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2025年12月30日 11:16 来源:
CY5-色醇(CY5-Tryptophol)是近红外荧光染料CY5与天然吲哚类化合物色醇(Tryptophol,化学名2-(1H-吲哚-3-基)乙醇)通过共价键偶联形成的荧光探针。其英文名称为Cyanine5-Tryptophol,属于花菁类荧光标记物。
化学结构与属性
色醇分子由吲哚环和乙醇侧链构成,侧链末端的羟基(-OH)是核心反应位点。CY5染料两端含羧基或氨基,通过EDC/NHS活化后与色醇的羟基发生酯化或酰胺化反应,形成稳定的共价键。偶联产物分子量约860-960 g/mol,保留了色醇的生物相容性和CY5的荧光特性。
物理化学特性
CY5-色醇在固态下呈紫红色至深蓝色粉末,易溶于DMSO、乙醇等极性有机溶剂,微溶于水。其吸收峰位于645-650 nm,发射峰在665-675 nm(近红外区),光稳定性优于传统荧光染料,抗光漂白能力强。熔点范围180-220℃,需避光、低温(-20℃)保存以防止降解。
功能与应用
1. 生物成像:利用近红外荧光穿透性强、背景干扰低的特点,实时追踪色醇在细胞内的代谢路径。例如,在肝癌细胞模型中,CY5-色醇可标记色醇的羟基化修饰过程,揭示其参与血清素合成的机制。
2. 药物递送:作为载体标记物,通过荧光信号监测药物释放位置。例如,将抗肿瘤药物与CY5-色醇偶联,利用色醇的靶向性(如穿透血脑屏障)实现精准递送。
3. 疾病诊断:检测色醇代谢异常相关疾病,如真菌感染或神经系统疾病。研究显示,白色念珠菌感染时,宿主细胞内色醇水平显著升高,CY5-色醇可作为诊断标志物。
实验操作细节
1. 合成步骤:将色醇溶于DMSO,加入EDC/NHS活化羧基,室温搅拌2小时后,按1:1.2摩尔比加入CY5-NHS酯,4℃反应12小时,纯化后得产物。
2. 细胞标记:将CY5-色醇(终浓度10 μM)加入肝癌细胞培养基,37℃孵育4小时,PBS洗涤后用共聚焦显微镜观察荧光分布。
3. 动物实验:通过尾静脉注射CY5-色醇(5 mg/kg)至小鼠体内,利用小动物活体成像系统监测其在肝脏和脑部的富集情况。
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