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CY7标记组蛋白,HIS-CY7,Cyanine7-碱性蛋白质,组蛋白-CY7,CY7-Histone

2025年12月27日 11:09 来源:

一、核心材料的化学物界定与定义

CY7标记组蛋白体系的核心构成包含两种关键材料,分别为荧光染料CY7与组蛋白(Histone)。其中,CY7的英文全称为Cyanine 7,化学名称为2-[(1E,3E,5E,7E)-7-(1,3,3-三甲基吲哚啉-2-亚基)庚-1,3,5-三烯-1-基]-1,3,3-三甲基吲哚啉碘化物,属于菁类荧光染料的典型代表,定义为一类具有共轭多烯链结构的有机荧光分子,可通过特定化学反应与生物大分子形成稳定结合。组蛋白(Histone)是一类富含碱性氨基酸(精氨酸、赖氨酸)的碱性蛋白质,英文全称为Histone,化学本质为L-α-氨基酸通过肽键连接形成的多肽链,定义为真核生物染色质的核心结构蛋白,主要功能是包裹DNA形成核小体结构,维持染色质的稳定与有序。

CY7标记组蛋白(CY7-Labeled Histone)作为两种材料的偶联产物,其定义为通过化学偶联技术将CY7荧光染料分子共价结合到组蛋白特定氨基酸残基上形成的荧光标记生物大分子探针,兼具组蛋白的生物活性与CY7的荧光特性。

二、核心材料的化学与物理属性

从化学属性来看,CY7的分子式为C₃₇H₄₃IN₂,分子量为646.66 g/mol,具有良好的化学稳定性,在中性及弱碱性环境下不易发生降解,可与氨基、巯基等官能团发生特异性偶联反应;组蛋白的化学属性因具体亚型(H1、H2A、H2B、H3、H4)略有差异,整体呈强碱性,等电点(pI)多在9.0以上,其氨基酸侧链的氨基可作为反应位点与CY7的活性基团结合;CY7标记组蛋白保留了组蛋白的碱性特征,同时引入了CY7的疏水共轭结构,偶联后化学稳定性优于单一组蛋白,在生理缓冲液中可稳定存在48小时以上。

物理属性方面,CY7的关键特征为近红外荧光特性,最大激发波长(Ex)约为750 nm,最大发射波长(Em)约为773 nm,摩尔吸光系数高(ε>200,000 M⁻¹cm⁻¹),荧光穿透性强;组蛋白为白色粉末状固体,易溶于水及稀酸溶液,难溶于有机溶剂,在溶液中可形成稳定的二级结构(α-螺旋为主);CY7标记组蛋白为淡黄色至橙色粉末,水溶性与组蛋白相近,在近红外光激发下可发出强烈且稳定的荧光,荧光量子产率约为0.28,相较于未标记组蛋白,其在溶液中的沉降系数略有增加,但仍可维持与DNA结合的空间构象。

三、CY7标记组蛋白的实验与应用领域

CY7标记组蛋白凭借其独特的理化特性,在生命科学研究领域具有广泛应用,核心应用场景集中在染色质动态变化监测与组蛋白功能研究相关实验中。在活细胞成像实验中,由于CY7的近红外荧光穿透性强、背景荧光干扰低,可用于标记细胞内的组蛋白,实时追踪染色质在细胞分裂、分化过程中的动态分布与重组过程,解决了传统荧光标记(如FITC、Alexa Fluor 488)在厚组织或活体内成像时穿透深度不足的问题。

在组蛋白- DNA相互作用研究中,CY7标记组蛋白可作为荧光探针,通过荧光偏振(FP)、荧光共振能量转移(FRET)等技术,定量分析组蛋白与DNA的结合亲和力、结合动力学参数,为解析核小体组装机制提供数据支撑。此外,在肿瘤研究领域,该标记物可用于检测癌细胞中组蛋白的修饰状态与定位变化,为肿瘤发生发展机制研究提供可视化工具;在药物筛选领域,可作为筛选靶向组蛋白修饰酶(如组蛋白去乙酰化酶)药物的工具,通过监测荧光信号变化评估药物对组蛋白- DNA相互作用的影响。


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