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2025年09月29日 10:58 来源:
一、材料组成与定义
CY5-甘氨酸是由甘氨酸(Glycine)与近红外荧光染料CY5(Cyanine5)通过共价键结合形成的荧光标记化合物。
甘氨酸:结构最简单的氨基酸,分子中仅含一个氢原子作为侧链,是蛋白质合成的基本单元之一,广泛参与生物代谢过程。
CY5:一种近红外荧光染料,激发波长为646 nm,发射波长为668 nm,具有高量子产率、良好的光稳定性和低背景荧光,适用于深层组织成像和高灵敏度检测。
结合方式:CY5的活性基团(如NHS酯或马来酰亚胺)与甘氨酸分子中的氨基(-NH₂)或羧基(-COOH)发生共价反应,形成稳定的酰胺键或酯键,生成CY5-甘氨酸复合物。
二、反应原理
CY5-甘氨酸的合成通常基于以下反应原理:
活性基团反应:CY5染料分子中的NHS酯基团与甘氨酸的氨基发生亲核取代反应,生成稳定的酰胺键。
反应式:CY5-NHS + Glycine → CY5-Glycine + NHS(副产物)
反应条件:
pH值:反应通常在弱碱性条件下进行(如pH 8.0-9.0),以促进氨基的去质子化,提高其与CY5-NHS的反应活性。
温度:反应温度需控制在适宜范围内(如25℃),以避免高温导致的分子降解或荧光淬灭。
反应时间:反应时间需足够长(如2-4小时),以确保标记效率与产物纯度。
纯化:反应完成后,需通过高效液相色谱(HPLC)或凝胶过滤等方法去除未反应的CY5染料和副产物,获得高纯度的CY5-甘氨酸。
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