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2025年09月11日 14:19 来源:
定义与功能
水溶性-CY5-活性酯(Sulfo-CY5-NHS),英文名称为Sulfo-CY5-NHS ester,是一种专为生物分子标记设计的近红外荧光试剂。该产品由磺化CY5染料与N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)活性基团共价连接而成,能够在温和条件下高效地与伯胺基团(-NH₂)发生反应,如蛋白质、抗体、多肽或氨基修饰核酸中的赖氨酸残基或N端氨基。其主要功能是实现水相体系中的荧光标记,无需有机溶剂助溶,极大提升了生物分子的标记效率与稳定性。Sulfo-CY5-NHS广泛应用于免疫荧光、Western blot、流式细胞术、活体成像及生物传感器构建,是现代分子探针技术中不可或缺的工具之一,特别适用于对水溶性和生物相容性要求高的实验场景。
荧光特性与光学表现
水溶性-CY5-活性酯(Sulfo-CY5-NHS)在激发波长约为649 nm处吸收最强,发射峰位于约670 nm,属于近红外(NIR)光区。其英文名称Sulfo-CY5-NHS ester准确反映了其化学结构与功能。该红色至近红外荧光具有良好的组织穿透能力,能有效避开生物样本的自发荧光干扰,显著提高信噪比和检测灵敏度。标记后的偶联物荧光强度高、光稳定性好,适合长时间成像和多色检测。其发射波长与Cy5、Alexa Fluor 647等通道兼容,便于在现有荧光设备上直接使用。由于近红外光对细胞毒性低,Sulfo-CY5-NHS特别适用于活细胞动态追踪和小动物活体成像研究,为高分辨率生物成像提供强有力支持。
结构与化学组成
水溶性-CY5-活性酯(Sulfo-CY5-NHS)的分子结构包含三个关键部分:磺化CY5花菁染料、间隔臂(spacer)和N-羟基琥珀酰亚胺酯(NHS ester)反应基团。其英文名称Sulfo-CY5-NHS ester明确指出了其水溶性(sulfo-)和活性酯特性。磺酸基团的引入显著增强其在水溶液中的溶解度,避免了传统CY5-NHS因疏水性导致的聚集和沉淀问题。NHS酯基团具有高度亲电性,可在pH 7.5–8.5条件下与伯胺快速反应,形成稳定的酰胺键,偶联效率高。整个分子经过纯化验证,确保批次一致性。这种结构设计使其成为一种高效、可靠的水相荧光标记工具,适用于多种生物大分子的共价修饰。
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