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2025年09月09日 11:47 来源:
水溶性-C5.5-炔基是一种结合近红外荧光染料Cyanine5.5(CY5.5)与炔基(-C≡CH)基团的水溶性化合物。其核心优势在于“荧光-点击化学”双功能设计:CY5.5提供近红外二区(NIR-II,约700 nm)的深红色荧光,穿透力强、背景噪声低;炔基基团则可通过“铜催化叠氮-炔环加成反应”(CuAAC)与含叠氮(-N₃)的分子高效共价结合。相较于传统标记方法(如氨基与羧基偶联),点击化学反应条件温和(常温、中性pH)、速度快(分钟级完成),且产物稳定性高,尤其适用于对温度或pH敏感的生物分子(如抗体、核酸)标记。
CY5.5的荧光发射波长(约700 nm)位于近红外二区,这一波段的光可穿透生物组织(如皮肤、肌肉)数毫米至厘米级,且生物体自身荧光(如血红蛋白、脂质)在此区域干扰极低。实验表明,使用Sulfo-CY5.5-Alkyne标记的抗体在活体小鼠肿瘤模型中,可清晰区分肿瘤边界与正常组织,信噪比比传统可见光染料(如FITC)提升10倍以上。此外,其荧光量子产率(约30%)与光稳定性(半衰期>10小时)显著优于同类近红外染料(如ICG),满足长时间动态监测需求。
· 生物成像:标记抗体或肽段,实现肿瘤、炎症等疾病的活体荧光成像;
· 蛋白质组学:通过点击化学标记新合成蛋白质,追踪翻译后修饰动态;
· 药物开发:标记药物分子,研究其在细胞内的分布与代谢途径;
· 材料科学:修饰纳米颗粒(如金纳米棒、量子点),构建荧光-磁性双模态探针。
例如,在阿尔茨海默病研究中,科学家利用Sulfo-CY5.5-Alkyne标记β-淀粉样蛋白探针,通过点击化学与患者脑脊液中的目标蛋白结合,实现了疾病标志物的超灵敏检测(检测限低至pM级)。
分子结构由三部分组成:CY5.5发色团、短链聚乙二醇(PEG)连接臂和末端炔基。PEG连接臂不仅增强分子柔韧性,减少空间位阻,还通过疏水屏蔽效应降低非特异性吸附;磺酸基团(-SO₃H)赋予分子强水溶性,可直接溶于生理缓冲液(如PBS),避免有机溶剂(如DMSO)对生物样本的损伤。
理化性质方面,该分子在pH 4-10范围内稳定,对离子强度(如高盐缓冲液)耐受性良好;储存时需避光、干燥,并在-20°C以下保存以防止光降解。其反应活性受铜催化剂浓度影响较小,10 μM CuSO₄即可实现高效点击反应,显著降低金属离子对生物分子的潜在毒性。
传统荧光标记需多步纯化(如透析、色谱分离),而Sulfo-CY5.5-Alkyne的点击化学反应产率高(>90%),副产物少,标记后仅需简单离心即可去除未反应试剂。此外,其水溶性设计消除了脂溶性染料易聚集导致的荧光淬灭问题,标记后的生物分子(如抗体)活性保留率>95%。在高通量筛选或临床诊断中,该产品可显著缩短实验周期(从数天缩短至数小时),同时降低操作误差,为科研与转化医学提供高效工具。
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