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2025年09月06日 11:51 来源:
中文名称:磺酸基-Cy3.5-乙基琥珀酰亚胺酯
英文名称:Sulfo-Cy3.5 NHS Ester
Sulfo-Cy3.5 NHS Ester是一种高性能的近红外荧光染料,通过乙基琥珀酰亚胺酯(NHS Ester)活性基团与生物分子(如蛋白质、抗体、核酸)的氨基(-NH₂)高效共价结合,实现靶向标记。其核心优势在于近红外发射波长(694 nm),可穿透深层组织并减少生物背景自发荧光干扰,广泛应用于生物成像、流式细胞术及分子检测领域。
· 荧光颜色:发射波长为694 nm,呈现明亮的橙红色至近红外荧光,与常见的绿色(FITC)或红色(Cy3)染料形成互补,支持多色标记实验。
· 光稳定性:在激光连续照射下,荧光信号衰减率低于5%/小时,是传统Cy3染料的2倍,适合长时间动态观测。
· 消光系数高:摩尔消光系数达250,000 M⁻¹cm⁻¹,即使低浓度标记也能产生强信号,降低对生物样本的毒性影响。
· 化学组成:由三部分构成:
1. 磺酸基-Cy3.5花菁染料:提供近红外荧光发射,磺酸基(-SO₃H)增强水溶性并减少非特异性吸附。
2. 乙基琥珀酰亚胺酯(NHS Ester):活性基团,在pH 7.2-8.5条件下与氨基快速反应(10-30分钟完成)。
3. 聚乙二醇(PEG)链接臂(部分型号):增加空间位阻,减少标记后生物分子的聚集。
· 结构特点:
· 水溶性优异:磺酸基使染料在生理缓冲液(如PBS)中溶解度达10 mg/mL,无需有机溶剂助溶。
· 反应特异性高:NHS Ester仅与伯氨基反应,对酪氨酸、组氨酸等侧链无交叉反应。
1. 活体成像:
· 标记肿瘤靶向抗体(如抗PD-L1),通过近红外成像实时监测药物在肿瘤组织的富集情况。
2. 流式细胞术:
· 多色标记细胞表面标志物(如CD4、CD8),区分T细胞亚群,灵敏度比传统PE通道高10倍。
3. 蛋白质组学:
· 标记重组蛋白后,通过SDS-PAGE或Western blot检测蛋白表达水平,避免同位素标记的辐射风险。
· 反应条件温和:无需高温或强酸强碱,4℃至室温均可高效标记。
· 标记效率高:1 mg抗体仅需0.5-1 μmol染料,成本较其他近红外染料降低40%。
· 兼容性广:支持与生物素、荧光素(FITC)等其他标记物联用,构建多模态检测体系。
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