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2025年12月31日 11:40 来源：
DBCO-Biotin是由点击化学核心基团二苯并环辛炔（Dibenzocyclooctyne，简称DBCO）与生物亲和分子生物素（Biotin，又称维生素H）通过共价键连接形成的功能性复合分子，其英文全称为Dibenzocyclooctyne-Biotin conjugate，常见化学别名包括DBCO-生物素、二苯并环辛炔-生物素偶联物，分子式可表示为C25H21N3O3S，分子量约为443.52。要深入理解DBCO-Biotin的特性与价值，需先明确其构成单元的核心定义与基础属性。
构成DBCO-Biotin的两个关键化学物各具独特属性：其中DBCO是一种不含金属催化条件即可发生反应的环炔类化合物，属于点击化学中的核心反应基团，其化学属性表现为环张力高、反应活性强，常温下即可与叠氮基团（-N3）发生特异性的1,3-偶极环加成反应（即“无铜点击化学”反应），且该反应不受水相、生物大分子等复杂环境干扰，具有极高的选择性和反应效率；生物素则是一种水溶性维生素，化学属性稳定，兼具脂溶性和水溶性双亲特性，其最核心的生物属性是与链霉亲和素（Streptavidin）、亲和素（Avidin）具有极强的特异性结合能力，解离常数（Kd）低至10-15 mol/L，形成的复合物稳定性远超抗原-抗体结合，且结合过程不受酸碱度、温度、有机溶剂等常规实验条件影响。
DBCO-Biotin作为复合分子，整合了两种构成单元的优势特性，其核心物理化学特性可概括为三点：一是反应特异性极强，仅能通过DBCO基团与叠氮基团发生点击反应，不与生物体内的氨基、羧基、羟基等常见官能团相互作用，有效避免非特异性结合；二是理化稳定性优异，在pH 4.0-10.0的环境中可稳定存在，耐受常规实验中的离心、孵育、洗涤等操作，且对蛋白酶、核酸酶等生物酶具有抗性；三是生物相容性良好，分子结构中的连接臂（通常为聚乙二醇或碳链）可减少空间位阻，既不影响DBCO的反应活性，也不干扰生物素与亲和素的结合，同时降低对生物样本（如细胞、蛋白质、核酸）的毒性。
基于上述特性，DBCO-Biotin在生命科学研究、医学检测、药物研发等领域具有不可替代的作用，是生物分子标记与分离纯化的核心工具。在蛋白质组学研究中，可通过DBCO基团与预先标记叠氮基团的蛋白质发生点击反应，实现目标蛋白质的特异性标记，再利用生物素与链霉亲和素磁珠的高亲和结合，快速富集目标蛋白，大幅提高蛋白质鉴定的灵敏度；在细胞生物学实验中，可用于细胞表面分子的定位追踪，将DBCO-Biotin与细胞表面的叠氮修饰分子结合后，通过荧光标记的链霉亲和素进行可视化检测，清晰呈现目标分子的分布与表达水平；在医学诊断领域，可作为探针分子构建免疫检测试剂盒，利用其特异性结合与富集能力，提升肿瘤标志物、病原体等目标检测物的检出效率；在药物研发中，可用于药物-靶点相互作用的验证，通过标记药物分子，追踪药物在生物体内的代谢路径与靶点结合情况。
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