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2025年12月26日 10:45 来源：
CY5-ADP是菁染料CY5与腺苷-5'-二磷酸（Adenosine 5'-diphosphate，ADP）通过共价键结合形成的荧光标记化合物。ADP作为生物体内能量代谢的核心分子，由腺苷通过焦磷酸键连接两个磷酸基团构成，而CY5的引入赋予其荧光可视化能力。
化学结构与物理特性
ADP的分子式为C₁₀H₁₅N₅O₁₀P₂，分子量427.2，呈白色固体，熔点高于145°C，微溶于水。CY5分子核心为多甲川链连接的吲哚环，带有正电荷，激发波长675nm、发射波长700nm，属于近红外荧光染料。二者结合后，CY5-ADP保留了ADP的磷酸基团活性位点，同时具备荧光发射能力，水溶性受CY5修饰程度影响，通常需添加DMSO等有机溶剂助溶。
功能与应用
1. 能量代谢动态追踪：在细胞呼吸研究中，CY5-ADP可通过荧光显微镜实时观察其在线粒体中的分布变化。例如，在氧化磷酸化过程中，ADP与ATP的转化速率可通过荧光信号强度变化量化，揭示线粒体功能状态。
2. 药物作用机制研究：作为PARP抑制剂尼拉帕尼的类似物标记物，CY5-ADP可用于研究DNA修复通路。通过共聚焦显微镜，可观察药物进入细胞核后与PARP蛋白的结合动态，解析合成致死效应的分子细节。
3. 纳米载体递送评估：在开发靶向递送系统时，CY5-ADP可作为模型分子，追踪纳米颗粒在体内的分布及药物释放过程。例如，脂质体包裹CY5-ADP后，通过流式细胞术分析肿瘤组织对载药系统的摄取效率。
实验操作细节
在荧光标记实验中，需严格控制反应条件：CY5与ADP的摩尔比通常为1:1.2，反应温度4°C以避免副反应，反应时间2小时后通过HPLC纯化。标记后的CY5-ADP需避光保存于-20°C，且需在2小时内完成实验以防止荧光淬灭。
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