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2025年12月15日 11:00 来源:
AF350-活性酯(Alexa Fluor 350-NHS)是生物医学领域中一种重要的荧光标记试剂,其核心由两部分构成:Alexa Fluor 350荧光团与N-羟基琥珀酰亚胺酯(NHS酯)。Alexa Fluor 350是一种蓝色荧光染料,其激发波长为343-346 nm,发射波长为439-442 nm,在紫外光激发下可发出明亮的蓝光信号,具有高荧光量子产率和光稳定性;NHS酯则是一种活化酯基团,化学结构为琥珀酰亚胺的衍生物,其分子式为C₁₆H₁₄N₂O₉S,分子量约410.35,常温下为灰黄色固体粉末,易溶于水及多数有机溶剂。
从物理化学特性来看,AF350-活性酯兼具荧光染料的灵敏性与活化酯的高反应活性。其荧光信号强度高、背景干扰低,且在pH 4-10的范围内保持稳定,不易因环境酸碱度变化而降解。NHS酯基团在碱性条件下(pH 7-9)可与含伯胺基团(R-NH₂)的生物分子(如蛋白质、核酸、多肽)发生亲核取代反应,生成稳定的酰胺键,这一特性使其成为生物标记的理想工具。例如,在蛋白质组学研究中,AF350-活性酯可通过标记抗体或抗原,实现样本中特定蛋白表达水平的定量检测;在细胞成像领域,其标记的细胞器或蛋白质可在荧光显微镜下清晰可视化,助力科学家追踪细胞内动态过程;在免疫荧光共定位实验中,AF350-活性酯可与AF488(绿色)、AF594(红色)等荧光染料联合使用,通过多色标记同时检测肿瘤组织中的上皮标志物、血管标志物及增殖标志物,光谱重叠度低于5%,显著提升实验分辨率。此外,该试剂还广泛应用于流式细胞术、DNA测序及荧光共振能量转移(FRET)实验,其低毒性和高稳定性使其成为体内外实验的优选荧光标记剂。
日期:2025-12-15
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