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2025年11月12日 11:50 来源:
在生物医学研究与临床诊断领域,CY5-甘氨酸作为一种新型近红外荧光标记化合物,通过将花青素类荧光染料CY5与天然氨基酸甘氨酸共价结合,实现了对生物分子的高灵敏度、低背景干扰的实时追踪。该材料凭借其独特的光学特性与生物相容性,成为蛋白质组学、细胞成像及疾病标志物检测的重要工具。
CY5-甘氨酸的化学结构由两部分构成:
1. CY5染料:属于花青素类荧光分子,分子中含共轭多甲川链与含氮杂环,激发波长为647 nm,发射波长660 nm,消光系数高达250,000 M⁻¹cm⁻¹,在近红外区(650-900 nm)发光,可穿透组织深度达10 mm以上。
2. 甘氨酸:最简单的α-氨基酸(C₂H₅NO₂),侧链为氢原子,具有强亲水性与无手性特征,广泛参与蛋白质合成及代谢调控。
其化学名称可表述为N-(5-羧基戊基)-4-[(5-羧基戊基)氨基]甲基-1,1'-二乙基-3,3,3',3'-四甲基吲哚菁-5,5'-二磺酸甘氨酸酯,商业名称包括CY5-Glycine、花青素5-甘氨酸等。
1. 高灵敏度生物标记:CY5的荧光量子产率(Φ=0.28)使其在纳米级浓度下仍可被检测,适用于单分子水平分析。例如,标记抗体后用于流式细胞术,可区分细胞表面10³个抗原分子。
2. 低背景干扰成像:近红外发射波长避开生物组织自发荧光(主要在400-600 nm),信噪比提升3-5倍。在肿瘤成像中,CY5-甘氨酸标记的肽段可特异性富集于胃癌细胞(CD44v6受体),荧光强度较传统FITC标记提高8倍。
3. 动态追踪能力:通过时间分辨荧光技术,可实时监测药物载体在体内的分布与代谢。例如,标记脂质体后,其血液循环半衰期延长至12小时,肿瘤组织蓄积量增加40%。
1. 活化CY5染料:将CY5-NHS酯(含活性羧基)溶解于无水DMF,加入三乙胺调节pH至8.5,生成高反应性中间体。
2. 甘氨酸偶联:在冰浴条件下,将甘氨酸(0.1 M)缓慢滴加至活化染料溶液,4℃反应12小时,通过酰胺键形成稳定共价结构。
3. 纯化验证:采用C18反相色谱柱去除未反应原料,质谱检测确认分子量(理论值:CY5-甘氨酸=785.2 Da,实测值785.1 Da),纯度>98%。
在阿尔茨海默病研究中,CY5-甘氨酸标记的β-淀粉样蛋白探针可穿透血脑屏障,实现脑内斑块的高分辨率成像(分辨率<50 μm),为早期诊断提供依据。其模块化设计还支持多模态成像,例如同时连接磁性纳米颗粒,实现MRI-荧光双模态示踪。
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