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2025年11月11日 11:50 来源：
一、核心功能：作为共价连接的荧光报告基团
CY5-NH₂本身不是一个药物或活性分子，它的核心功能是作为一个明亮的、在近红外波段发光的“标签”。其末端的氨基可以与多种官能团发生高效、稳定的共价反应，从而将CY5的荧光“安装”到目标分子上。
主要化学反应靶点：
羧基（-COOH）：在缩合剂（如EDC）存在下，CY5-NH₂的氨基可与羧基形成稳定的酰胺键。这是最常见的标记方式。
醛基（-CHO）：通过还原胺化反应形成稳定的仲胺键。
活性酯（-NHS）：CY5-NH₂的氨基可以轻易地与N-羟基琥珀酰亚胺酯反应，形成酰胺键。
二、主要应用领域
基于上述核心功能，CY5-NH₂的应用广泛渗透于生命科学研究的各个层面。
1. 蛋白质与抗体的标记
作用：将CY5-NH₂共价连接到特定的抗体或蛋白质上。
功能：
免疫荧光染色：用于细胞或组织切片中目标抗原的定位、定性和定量分析。通过荧光显微镜，可以清晰地看到目标蛋白的分布。
Western Blot检测：标记的二抗可以用于Western Blot实验，实现蛋白质表达的灵敏检测。
生物分子相互作用研究：通过荧光偏振（FP）、表面等离子共振（SPR）等技术，研究蛋白质-蛋白质、蛋白质-核酸之间的相互作用动力学。
2. 核酸标记与检测
作用：通过合适的连接臂或反应试剂，将CY5-NH₂连接到DNA或RNA的核苷酸上（通常是在合成过程中引入）。
功能：
荧光原位杂交（FISH）：用于染色体异常、基因表达定位等研究。
基因芯片：作为荧光探针，与芯片上的基因序列杂交，进行高通量基因表达分析。
实时荧光定量PCR（qPCR）：用作TaqMan探针等的报告荧光基团。
DNA测序：在早期的桑格测序和高通量测序中用作荧光标记。
3. 纳米颗粒与药物递送系统的功能化
作用：将CY5-NH₂连接到脂质体、聚合物纳米粒、金纳米棒等纳米载体的表面。
功能：
体内示踪：通过小动物活体成像系统，非侵入性地实时追踪纳米载体在动物体内的分布、靶向富集情况和代谢清除路径。这是其最重要的应用之一。
细胞摄取研究：用流式细胞术或共聚焦显微镜观察细胞对纳米载体的吞噬和内化过程。
4. 细胞标记与示踪
作用：利用其膜渗透性（或与特定细胞穿透肽连接），将CY5-NH₂或其标记物导入细胞内。
功能：
细胞增殖与迁移研究：可以用它来预标记细胞（如干细胞、免疫细胞），然后将其回输到动物体内，长期追踪这些细胞的命运、迁移、归巢和增殖情况。
细胞器染色：通过与特定靶向配体结合，可用于标记特定的细胞器。
三、选择CY5-NH₂的独特优势
选择它而不仅仅是普通的CY5染料，主要基于其氨基带来的优势：
定向标记：可以实现更可控、更均一的标记，减少因标记位点不明确导致的生物活性丧失。
灵活性：用户可以根据需要，自行将其与含有羧基、醛基或NHS酯的分子连接，定制各种探针，而不必受限于商业化的特定标记试剂盒。
稳定性：形成的共价键（尤其是酰胺键）非常稳定，适合长期的体外和体内实验。
总结来说，CY5-NH₂是一个功能强大的“分子灯塔建造师”。它通过其化学反应活性的氨基，将自身优异的近红外荧光特性“赋予”给各种生物分子和纳米材料，从而让研究人员能够在从微观到宏观的不同尺度上，“看见” 原本不可见的生命活动过程。
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