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2025年10月18日 10:27 来源:
生物素(Biotin):
一种维生素B群成员(维生素H),可通过共价键与蛋白质或肽链结合,形成生物素化复合物。生物素能与亲和素(Avidin)或链霉亲和素(Streptavidin)高特异性结合,常用于生物检测、免疫分析及成像实验。
生物素淀粉样蛋白肽:
在淀粉样蛋白肽的特定位置(如N端或C端)引入生物素基团,形成兼具淀粉样蛋白聚集特性与生物素标记功能的衍生物。
2. 分类与具体定义
根据淀粉样蛋白肽的片段长度和修饰方式,生物素淀粉样蛋白肽可分为以下类型:
(1) 生物素-β-淀粉样蛋白肽(1-40)
结构:由β-淀粉样蛋白前40个氨基酸(Aβ1-40)组成,N端连接生物素。
特性:
保留Aβ1-40的天然构象,包括疏水核心区(如KLVFF序列)和亲水区段。
生物素通过柔性间隔臂(如六碳氨己酸,Ahx)连接,减少对肽链二级结构的干扰。
应用:
研究Aβ聚集机制、纤维形成过程及其与膜蛋白、金属离子的相互作用。
通过生物素-亲和素系统实现可视化定位、固定化或结合测定(如ELISA、荧光显微镜分析)。
(2) 生物素-β-淀粉样蛋白肽(17-40)
结构:由Aβ17-40片段(24个残基)组成,N端生物素化。
特性:
包含Aβ的核心疏水区(LVFF序列),促进β-折叠结构形成。
生物素化可能增强肽的稳定性或溶解度。
应用:
研究Aβ片段的聚集行为及其在神经退行性疾病中的作用。
开发针对Aβ特定区段的抑制剂或诊断工具。
(3) 生物素-Ahx-β-淀粉样蛋白肽(1-40)
结构:在Aβ1-40的N端引入生物素和六碳氨己酸间隔臂(Ahx)。
特性:
Ahx作为柔性连接臂,保持Aβ核心序列的天然折叠。
生物素基团提供可控标记位点,便于后续固定化操作。
应用:
结合荧光标记链霉亲和素复合物或金标探针,研究Aβ聚集结构与细胞表面结合。
用于表面等离子体共振(SPR)检测或流式细胞术分析。
3. 核心特性与应用场景
物理性质:
通常为白色或类白色冻干粉,疏水性强,易溶于DMSO、6M GuHCl或10mM NaOH等溶剂。
稳定性受温度、pH影响,高温或强酸强碱环境可能导致构象变化。
应用领域:
生物检测:通过生物素-亲和素系统实现高特异性结合,用于ELISA、Western blot及免疫沉淀实验。
成像分析:结合荧光标记链霉亲和素,追踪Aβ动态变化(如聚集动力学、配体结合行为)。
纳米载体研究:与脂质体或纳米颗粒结合,模拟细胞膜交互和体外聚集实验。
疾病机制研究:探索Aβ磷酸化调控、信号通路影响及其在神经退行性疾病中的作用。
4. 注意事项
科研用途:生物素淀粉样蛋白肽仅供实验室研究使用,不可用于人体实验。
储存条件:需密封存放于-20℃(长期)或2-8℃(短期),避免反复冻融。
操作灵活性:生物素标记便于与多种检测体系结合,但需控制实验条件以维持肽的稳定性。
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